昆虫学报 ›› 2016, Vol. 59 ›› Issue (1): 25-32.doi: 10.16380/j.kcxb.2016.01.004
吴帆, 黄君君, 谭静, 唐明珠, 李红亮*
WU Fan, HUANG Jun-Jun, TAN Jing, TANG Ming-Zhu, LI Hong-Liang*
摘要: 【目的】气味结合蛋白在中华蜜蜂Apis cerana cerana嗅觉系统中起到重要作用,本实验拟研究中华蜜蜂一个新的信息素结合蛋白OBP10及其与蜜蜂信息素以及蜜源开花植物挥发物的结合特性。【方法】本实验通过RT-PCR扩增获得OBP10基因全长(GenBank登录号: KP717060.1),以pET-30a构建原核表达载体,并以Ni2+琼脂糖柱进行重组蛋白表达和分离纯化,在N-苯基-1-萘胺(N-phenyl-1-naphthylamine, 1-NPN)作为荧光报告子下利用荧光光谱法体外研究重组AcerOBP10与多种候选化学配基的结合特征。【结果】经多序列联配分析,发现AcerOBP10的多个同源基因均为信息素结合蛋白(pheromone binding proteins, PBPs)。配基结合特性分析显示,AcerOBP10对14种候选配基中的蜂王信息素成分对羟基苯甲酸甲酯(HOB)竞争力最大,相对荧光可降至6.06%,解离常数11.04 μmol/L;进一步表明AcerOBP10属于一个新的中蜂PBPs。此外,AcerOBP10也能和包括工蜂信息素(香叶醇和橙花醇)、报警信息素(2-庚酮和乙酸异戊酯)等蜜蜂信息素以及蜜源开花植物挥发物之一的β-紫罗兰酮结合,表明AcerOBP10可能是一种以信息素结合为主的多功能结合蛋白。【结论】AcerOBP10是中蜂一个新的信息素结合蛋白,与此前我们鉴定的蜂王信息素结合蛋白AcerASP1相比,AcerOBP10对蜜蜂信息素的结合谱更为广泛,这些结果将对进一步研究中华蜜蜂信息素识别和传递提供理论基础,对于深入了解中华蜜蜂嗅觉影响生理功能的行为机制具有重要意义。